在生物制藥、精細(xì)化工與天然產(chǎn)物提取領(lǐng)域，工業(yè)級(jí)層析柱長(zhǎng)期運(yùn)行后易因樣品殘留、雜質(zhì)吸附或微生物滋生導(dǎo)致柱效下降、背壓升高與峰形拖尾?？茖W(xué)、系統(tǒng)的清洗
工業(yè)級(jí)層析柱是恢復(fù)柱性能、延長(zhǎng)使用壽命、保障批次間一致性的關(guān)鍵。
1、清洗前準(zhǔn)備
關(guān)閉系統(tǒng)泵與閥門，卸除層析柱壓力。確認(rèn)清洗溶劑與柱填料（如瓊脂糖、硅膠、聚合物）的兼容性，避免溶脹或塌陷。準(zhǔn)備去離子水、緩沖液、再生劑與消毒液，連接清洗管路，確保流向與層析方向一致（通常為正向沖洗）。
2、初步?jīng)_洗
用5-10倍柱體積（CV）的去離子水低流速?zèng)_洗，去除鹽類、緩沖液及水溶性雜質(zhì)。觀察流出液澄清度，直至電導(dǎo)率接近進(jìn)水值。此步可有效降低后續(xù)清洗劑消耗。
3、去蛋白清洗
針對(duì)蛋白類樣品殘留，使用0.5-1MNaOH溶液循環(huán)清洗1-2小時(shí)（瓊脂糖基質(zhì)耐受性強(qiáng)，硅膠柱禁用）。NaOH可水解蛋白質(zhì)、滅活內(nèi)毒素并去除脂類。流速控制在操作上限的50%以下，避免壓降突增。結(jié)束后用去離子水沖洗至中性。
4、去脂與疏水雜質(zhì)清洗
對(duì)于疏水性雜質(zhì)或脂類殘留，采用30-70%乙醇或異丙醇清洗2-3CV。部分系統(tǒng)可用含0.1-0.5%TritonX-100的緩沖液短時(shí)沖洗，增強(qiáng)去污力。注意有機(jī)溶劑對(duì)密封圈的溶脹影響，清洗后充分水化。
5、在位消毒（SIP）
在GMP環(huán)境中，定期執(zhí)行在位消毒。常用0.5-1.0MNaOH溶液循環(huán)1小時(shí)，或200ppm次氯酸鈉沖洗30分鐘。結(jié)束后用大量去離子水沖洗至無(wú)殘留，防止氧化損傷填料。
6、再生與平衡
清洗后，用初始平衡緩沖液（如20mMPBS）沖洗5-10CV，使填料恢復(fù)離子狀態(tài)與pH環(huán)境。檢測(cè)流出液pH與電導(dǎo)穩(wěn)定，方可重新上樣。
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